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牡蠣受精卵製備與應用概論

製作方式:

1. 一般公：母比例是1：10，公母分辨可以注意擠出的生殖線有無顆粒，偏黃色有顆粒是母的。
2. 將卵巢與精巢取出，放在海水中捏碎搓一搓，或是用小刀劃破卵巢與精巢，放入海水中輕輕攪拌一下（比較龜毛的會用鵝毛攪拌），然後靜置一會約10-15鐘。
3. 吸取沈在下面的受精卵或倒掉上層海水，再用乾淨海水清洗幾次，可以避免重複受精變成死卵。受精卵約50-60μm，可以過200-300目網布濾掉一些雜質。
4. 加入乾淨海水微打氣，7-8小時後會孵化成擔輪子幼蟲，即可使用400目網布收集餵食。

牡蠣屬於軟體動物雙枚貝類，亦是水產養殖中產量最大的貝類。台灣西部沿岸之淺海灘地有相當廣闊的面積適合其棲息，鹽度在25 ppt 左右最適合其生存。牡蠣的分布甚廣，除極區外，世界各海域均有牡蠣生息。目前台灣牡蠣養殖主要分佈於高潮線與低潮線之間，種類以真牡蠣為主，又名巨牡蠣(Crassostrea gigas)；另外俗稱之「石蚵」者為星牡蠣(Saxostrea spp.)，多附著於岩石上，產量不多。牡蠣養殖歷史悠久，在台灣養殖的方式有插竹式、棚架平掛式、棚架垂吊式、浮筒延繩式與浮筏垂吊式等幾種。一般養殖業者多以天然採苗方式，利用牡蠣殼作為採苗器，將牡蠣殼中間打孔，用塑膠繩將串連成串，垂掛於採苗區距海底約1 公尺處；經過約2 週的附苗，可見約0.2 公分、形狀呈褐色的牡蠣苗，附著完成後，再其分開成蚵串養殖。採苗區通常在遠離河口鹽度適中、風浪小、漲潮水位在2 公尺的潮間帶、地形平坦潮流暢通的沙灘地形最為理想。苗又分為春苗、秋苗，十月至隔年二月採苗稱春苗，七、八月間採苗者稱為秋苗。牡蠣亦可進行人工繁殖，取生殖腺飽滿之牡蠣，分開雄雌。一般性成熟的牡蠣，撥開外殼後，其生殖腺幾佔三分之二的身體重量。牡蠣無法從其外部的貝殼辨別出性徵來定雄雌，需對其生殖腺鏡檢；取部分精巢或卵巢，在顯微鏡下觀察，卵呈梨形，精子則為極微細顆粒狀；有經驗者可在擠取生殖腺時判斷之，雌牡蠣之卵巢顆粒較大，有顆粒懸浮狀，而雄牡蠣則較為澄清，若稀釋之牛奶。進行人工受精時，僅需少許雄牡蠣就足夠。牡蠣卵受精後，需經過洗卵的過程，避免多重受精產生畸形胚胎。卵受精後會放出第一極體，幾分鐘後放出第二極體；受精後四小時進入擔輪子期，當發育至原腸出現時，形成有多數纖毛的游泳器官稱為被面子；16小時以後進入D形幼苗期，此時長出透明軟殼以纖毛游泳，並濾食水中的浮游藻，添加飼育藻水以等鞭金藻、梭針藻、周氏扁藻及角毛藻等作為餌料生物。經過一週左右進入頂殼期，殼開始兩側不對稱，較大為下殼，較小為上殼。之後進入眼點期，幼苗長出對光線有反應的單眼點；再經2至5天形成偽足，此時距受精時間約三週左右，幼苗以偽足在固著表面上爬行至適當地點，便分泌足絲固定，此階段亦為進行附苗的時期，牡蠣苗若在2 日內未能附著則死亡。附著後進入變態期，偽足、眼點消失，開始以鰓作為呼吸器官，進行固著、濾食生活。

方法:

1. 選取大型種貝，以螺絲起子撬開殼後，取少許生殖腺組織在顯微鏡下觀察，將雌雄牡蠣分開，分別收集精、卵。
2. 雄牡蠣僅需數枚即可，將雌牡蠣卵集中後，加入雄牡蠣精巢受精後約10 分鐘，開始進行洗卵。
3. 洗卵過程以添加乾淨海水，倒去上層液，洗去未受精的精子，重複二至三次，便獲得牡蠣受精卵。
4. 將受精卵置於溫度25 度的定溫水槽中，打氣培養，每隔固定時間，取樣在顯微鏡下觀察，記錄胚胎發育過程。